Аминосалициловая кислота
C7H7NO3 153,14
Бензойная кислота, 4-амино-2-гидрокси-.
4-Аминосалициловая кислота [65-49-6].
» Аминосалициловая кислота содержит не менее 98,5 процентов и не более 100,5 процентов C7H7NO3 в пересчете на безводный вес.
[Внимание - Ни при каких обстоятельствах не используйте раствор, приготовленный из аминосалициловой кислоты, если его цвет темнее, чем у свежеприготовленного раствора.]
Упаковка и хранение- Хранят в плотной, светостойкой таре, при температуре не выше 30°С.
Справочные стандарты USP<11>-
USP Аминосалициловая кислота RS
USP м-Аминофенол RS
Прозрачность и цвет раствора- Один г растворяется в 10 мл раствора бикарбоната натрия (1 из 15) с образованием прозрачного раствора не более бледно-желтого цвета. Один г растворяется в свежеприготовленной смеси 5 мл азотной кислоты и 45 мл воды с образованием прозрачного раствора не более слабого цвета.
Идентификация-
А: Растворите 0,25 г в 3 мл 1 N гидроксида натрия, перенесите в мерную колбу вместимостью 500 мл, разбавьте водой до нужного объема и перемешайте. Перенесите аликвоту объемом 5 мл в мерную колбу емкостью 250 мл, содержащую 12,5 мл фосфатного буфера с pH 7 (см. «Буферные растворы» в разделе «Реагенты, индикаторы и растворы»), разбавьте водой до нужного объема и перемешайте. Этот раствор при сравнении в подходящем спектрофотометре с контрольным раствором того же буфера в той же концентрации демонстрирует максимумы поглощения при 265 ± 2 и 299 ± 2 нм, а соотношение A265/A299 составляет от 1,50 до 1,56.
Б: Поместите около 1 г в небольшую круглодонную колбу и добавьте 10 мл уксусного ангидрида. Нагрейте колбу на паровой бане в течение 30 мин, добавьте 40 мл воды, перемешайте, профильтруйте, охладите и оставьте до кристаллизации диацетильного производного. Собрать осадок на фильтре, хорошо промыть водой и высушить при 105°С в течение 1 ч: полученное таким образом диацетильное производное плавится между 191 и 197°С.
C: 0,1 г взболтать с 10 мл воды и профильтровать. К 5 мл фильтрата прибавляют 1 каплю хлорного железа ИР: образуется фиолетовое окрашивание.
pH<791>: от 3,0 до 3,7, в насыщенном растворе.
Вода, Метод I<921>: не более 0,5%.
Остаток при прокаливании<281>: не более 0,2%.
Хлорид<221>- 0,50 г растворяют в смеси 5 мл азотной кислоты и 15 мл воды: в растворе содержится не больше хлоридов, чем соответствует 0,30 мл 0,020 N соляной кислоты (0,042%).
Тяжелые металлы, Метод II 231: 0,003%.
Предел м-аминофенола-
Подвижная фаза- Подготовьте, как указано в анализе.
Внутренний стандартный раствор - Приготовьте раствор сульфаниламида в подвижной фазе с концентрацией около 5 мкг на мл.
Стандартное решение- Растворите точно взвешенное количество USP m-Aminophenol RS в подвижной фазе, чтобы получить раствор с известной концентрацией около 12 мкг на мл. Перенесите 10,0 мл этого раствора и 10,0 мл раствора внутреннего стандарта в низкоактиническую мерную колбу емкостью 100 мл, разбавьте подвижной фазой до нужного объема и перемешайте.
Тестовое решение - Перенесите около 50 мг точно взвешенной аминосалициловой кислоты в низкоактиническую мерную колбу емкостью 100 мл, добавьте 50 мл подвижной фазы и перемешайте до растворения. Добавьте 10,0 мл раствора внутреннего стандарта, разбавьте подвижной фазой до необходимого объема и перемешайте.
Хроматографическая система (см. Хроматография<621>)-Жидкостный хроматограф оснащен детектором 280-нм и колонкой размером 4,6-мм × 25-см, содержащей насадку L1 10-мкм. Скорость потока составляет около 1,5 мл в минуту. Хроматографируйте стандартный раствор и записывайте ответы пиков, как указано в процедуре: относительное время удерживания составляет около 0,66 для сульфаниламида и 1,0 для маминофенола; разрешение R между маминофенолом и сульфаниламидом составляет не менее 2,5; а относительное стандартное отклонение для повторных инъекций составляет не более 7%.
Процедура- [примечание-После использования промывайте колонку в течение 30 минут отфильтрованной и дегазированной смесью метанола, воды и фосфорной кислоты (77:23:0,6), а затем промывайте в течение 30 минут отфильтрованной и дегазированной смесью метанола и воды (50:50). ] Отдельно введите в хроматограф равные объемы (около 20 мкл) стандартного раствора и тестируемого раствора, запишите хроматограммы и измерьте отклики основных пиков. Рассчитайте процентное содержание м-аминофенола по отношению к количеству аминосалициловой кислоты в взятой порции аминосалициловой кислоты по формуле:
10(С/Ш)(РУ/РС)
где C представляет собой концентрацию, мкг на мл, USP m-Aminophenol RS в стандартном растворе, W представляет собой количество аминосалициловой кислоты в мг в взятой порции аминосалициловой кислоты, определенное в анализе; RU и RS представляют собой отношения отклика пика маминофенола к отклику пика сульфаниламида, полученного из тестируемого раствора и стандартного раствора; соответственно: обнаруживается не более 0,25% м-аминофенола.
Сероводород, диоксид серы и амиловый спирт- Около 500 мг растворяют в 5 мл 1 н. гидроксида натрия, прибавляют 6 мл 3 н. соляной кислоты и энергично перемешивают: запаха сероводорода или сернистого газа не ощущается, а также ощущается не более чем слабый запах амиловых спиртов. Кусочек смоченной тестовой бумаги с ацетатом свинца, помещенный над смесью, не обесцвечивается.
анализ-
Подвижная фаза- Приготовьте смесь из 425 мл 0,05 М двухосновного фосфата натрия, 425 мл 0,05 М одноосновного фосфата натрия и 150 мл метанола, содержащего 1,9 г гидроксида тетрабутиламмония. Отфильтруйте и дегазируйте. При необходимости внесите изменения (см. «Пригодность системы», раздел «Хроматография 621»).
Внутренний стандартный раствор - Приготовьте раствор ацетаминофена в мобильной фазе с концентрацией около 5 мг на мл.
Стандартная подготовка- Перенесите около 12,5 мг аминосалициловой кислоты RS, точно взвешенной, в низкоактиническую мерную колбу емкостью 25 мл, добавьте 15 мл подвижной фазы и перемешайте до растворения. Добавьте 2,5 мл раствора внутреннего стандарта, разбавьте подвижной фазой до необходимого объема и перемешайте.
Подготовка к анализам- Готовьте, как указано для стандартного приготовления, за исключением использования аминосалициловой кислоты вместо аминосалициловой кислоты USP RS.
Хроматографическая система (см. Хроматография<621>)-Хроматограф оснащен детектором 254-нм и колонкой размером 4,6-мм × 25-см, содержащей насадку L1. Скорость потока составляет около 1,5 мл в минуту. Хроматографируйте стандартный препарат и записывайте ответы пиков, как указано в процедуре: относительное время удерживания составляет около 0,83 для ацетаминофена и 1,0 для аминосалициловой кислоты; разрешение R между аминосалициловой кислотой и ацетаминофеном составляет не менее 1,7; и относительное стандартное отклонение отношений отклика пика аминосалициловой кислоты к отклику пика ацетаминофена составляет не более 1,0%.
Процедура- [примечание-После использования промывайте колонку в течение 30 минут отфильтрованной и дегазированной смесью метанола, воды и фосфорной кислоты (77:23:0,6), а затем промывайте в течение 30 минут отфильтрованной и дегазированной смесью метанола и воды (50:50).] Отдельно введите в хроматограф равные объемы (около 20 мкл) стандартного препарата и препарата для анализа, запишите хроматограммы и измерить отклики основных пиков. Рассчитайте количество в мг C7H7NO3 в аминосалициловой кислоте по формуле:
25С(РУ/РС)
где C представляет собой концентрацию RS аминосалициловой кислоты USP в мг на мл в стандартном препарате; и RU и RS представляют собой отношения ответа пика аминосалициловой кислоты к отклику пика ацетаминофена, полученного от препарата для анализа и стандартного препарата, соответственно.