Алендронат натрия
C4H12NNaO7P2·3H2O 325,12
Фосфоновая кислота, (4-амино-1-гидроксибутилиден)бис-, мононатриевая соль, тригидрат.
Тригидроген(4-амино-1-гидроксибутилиден)дифосфонат натрия, тригидрат [121268-17-5].
» Алендронат натрия содержит не менее 98,0 процентов и не более 102,0 процентов C4H12NNaO7P2 в пересчете на сухое вещество.
Упаковка и хранение- Хранить в хорошо закрытых контейнерах. Хранить при комнатной температуре.
Справочные стандарты USP<11>-
USP Алендронат натрия RS
Идентификация-
A: Инфракрасное поглощение<197M>.
B: Соответствует требованиям испытания на пламя натрия<191>.
Потери при сушке<731>- Высушите его при давлении не более 5 мм рт. ст. при 140°С до постоянного веса: он потеряет не менее 16,1% и не более 17,1% своего веса.
Тяжелые металлы, Метод III<231>: 0,001%.
Хроматографическая чистота-
Боратный раствор и разбавитель - Подготовьте, как указано в анализе.
Буферный раствор- 5,88 г дигидрата цитрата натрия и 2,84 г безводного двухосновного фосфата натрия переносят в мерную колбу вместимостью 2 л, разбавляют водой до объема и перемешивают. Доведите pH фосфорной кислотой до 8 и пропустите раствор через фильтр с пористостью 0,5 мкм или меньше.
9-Раствор флуоренилметилхлорформиата- Приготовьте раствор в ацетонитриле, содержащий около 4 мг 9-флуоренилметилхлорформиата на мл. Приготовьте этот раствор свежим непосредственно перед использованием.
Решение А - Приготовьте отфильтрованную и дегазированную смесь буферного раствора и ацетонитрила (17:3).
Решение Б - Приготовьте отфильтрованную и дегазированную смесь ацетонитрила и буферного раствора (7:3).
Подвижная фаза- Используйте переменные смеси растворов A и B, как указано для хроматографической системы. При необходимости внесите коррективы (см. «Пригодность системы» в разделе «Хроматография<621>»).
Стандартный стандартный раствор - Приготовьте раствор алендроната натрия RS USP в разбавителе с известной концентрацией около 0,6 мг на мл.
Стандартное решение- Перенесите 5,0 мл стандартного исходного раствора в полипропиленовую центрифужную пробирку с завинчивающейся крышкой объемом 50 мл, содержащую 5 мл раствора бората. Добавьте 5 мл ацетонитрила и 5 мл раствора 9-флуоренилметилхлорформиата и встряхивайте в течение 45 секунд. Дать постоять при комнатной температуре 30 минут. Добавьте 20 мл метиленхлорида и энергично встряхивайте в течение 1 минуты. Центрифугируйте в течение 5–10 минут и используйте часть прозрачного верхнего водного слоя.
Разбавленный стандартный раствор - Разбавьте часть исходного раствора стандарта разбавителем, чтобы получить раствор с известной концентрацией около 0,6 мкг на мл. Используя 5 мл этого раствора, действуйте, как указано для стандартного раствора, начиная с «в полипропиленовую центрифужную пробирку с завинчивающейся крышкой емкостью 50 мл».
Реагентный бланк - Используя порцию разбавителя объемом 5,0 мл, действуйте, как указано для стандартного раствора, начиная с «в полипропиленовую центрифужную пробирку с завинчивающейся крышкой емкостью 50 мл».
Тестовое решение - Перенесите около 30 мг алендроната натрия, точно взвешенного, в мерную колбу емкостью 50 мл, растворите и разбавьте разбавителем до объема и перемешайте. Используя объем этого раствора 5,0 мл, действуйте, как указано для стандартного раствора, начиная с «в полипропиленовую центрифужную пробирку с завинчивающейся крышкой объемом 50 мл».
Хроматографическая система (см. Хроматография<621>)- Жидкостный хроматограф оснащен детектором 266 нм и колонкой размером 4,1 мм × 25 см, содержащей насадку L21. Скорость потока составляет около 1,8 мл в минуту. Температуру колонки поддерживают около 45°С. Хроматограф программируют следующим образом.
Время (минуты) Раствор А (%) Раствор Б (%) Элюирование
0 100 0 уравновешивание
0-15 100→50 0→50 линейный градиент
15-25 50→0 50→100 линейный градиент
25-27 0→100 100→0 линейный градиент
27-32 100 0 изократический
Хроматографируйте стандартный раствор и разбавленный стандартный раствор и записывайте ответы пиков, как указано в процедуре: фактор хвоста для основного пика на хроматограмме стандартного раствора не превышает 2,0; и пик в этом локусе на хроматограмме разбавленного стандартного раствора обнаруживается при отношении сигнал-шум не менее 3.
Процедура- Отдельно введите в хроматограф равные объемы (около 20 мкл) тестируемого раствора и бланка реагента, запишите хроматограммы и измерьте отклики для всех пиков. Не обращайте внимания на любые пики, соответствующие пикам, полученным на холостом реагенте. Рассчитайте процентное содержание каждой примеси в принятой порции алендроната натрия по формуле:
100(ри/РС)
где ri — площадь каждого пика примеси, а rs — сумма всех пиков примесей и основного пика: обнаружено не более 0,1% любой отдельной примеси и не более 0,5% общего количества примесей.
анализ-
Буферный раствор- 14,7 г дигидрата цитрата натрия и 7,05 г безводного двухосновного фосфата натрия переносят в мерную колбу вместимостью 1 л, разбавляют водой до объема, перемешивают и доводят pH фосфорной кислотой до 8.
Разбавитель- 29,4 г дигидрата цитрата натрия растворяют в воде в мерной колбе вместимостью 1 л, доводят водой до объема и перемешивают.
Боратный раствор - В мерной колбе вместимостью 1 л растворяют 19,1 г бората натрия в воде, доводят водой до объема и перемешивают.
9-Раствор флуоренилметилхлорформиата- Приготовьте раствор в ацетонитриле, содержащий около 0,5 мг 9-флуоренилметилхлорформиата на мл. Приготовьте этот раствор свежим непосредственно перед использованием.
Подвижная фаза- Приготовьте отфильтрованную и дегазированную смесь буферного раствора, ацетонитрила и метанола (70:25:5). При необходимости внесите коррективы (см. «Пригодность системы» в разделе «Хроматография<621>»).
Стандартная подготовка материала- Приготовьте раствор алендроната натрия RS USP в разбавителе с известной концентрацией около 0,1 мг на мл. Рассчитайте концентрацию CS безводного алендроната натрия в этом растворе.
Стандартная подготовка- Перенесите 5,0 мл стандартного исходного препарата в полипропиленовую центрифужную пробирку с завинчивающейся крышкой объемом 50 мл, содержащую 5 мл раствора бората. Добавьте 5 мл раствора 9-флуоренилметилхлорформиата и встряхивайте в течение 30 секунд. Дать постоять при комнатной температуре 25 минут. Добавьте 25 мл метиленхлорида и энергично встряхивайте в течение 1 минуты. Центрифуга в течение 5–10 минут. Используйте часть прозрачного верхнего водного слоя.
Реагентный бланк - Используя 5,0 мл разбавителя, действуйте, как указано для приготовления стандарта, начиная с «в полипропиленовую центрифужную пробирку с завинчивающейся крышкой емкостью 50 мл».
Подготовка материала для анализа- Перенесите примерно 25 мг алендроната натрия, точно взвешенного, в мерную колбу емкостью 250 мл, растворите в ней разбавитель и перемешайте.
Подготовка к анализам- Используя 5,0 мл исходного препарата для анализа, действуйте, как указано для приготовления стандарта, начиная с «в полипропиленовую центрифужную пробирку емкостью 50 мл с завинчивающейся крышкой».
Хроматографическая система (см. Хроматография<621>)- Жидкостный хроматограф оснащен детектором 266 нм и колонкой размером 4,1 мм × 25 см, содержащей насадку L21. Скорость потока составляет около 1,2 мл в минуту. Температуру колонки поддерживают на уровне около 35°С. Хроматографируют стандартный препарат и записывают ответы пиков, как указано в процедуре: эффективность колонки составляет не менее 1500 теоретических тарелок, фактор хвоста - не более 1,5, а относительное стандартное отклонение для повторных введений - не более 2,0%.
Процедура: отдельно введите в хроматограф равные объемы (около 10 мкл) стандартного препарата, препарата для анализа и холостого реагента, запишите хроматограммы и измерьте отклики основных пиков. Рассчитайте количество, в мг, C4H12NNaO7P2 в взятой порции алендроната натрия по формуле:
РСУ (ру/РС)
где D представляет собой коэффициент разбавления для приготовления исходного материала для анализа; CS соответствует определению, приведенному в разделе «Стандартная подготовка массы»; и rU и rS представляют собой отклик площади пика для алендроновой кислоты, полученной из препарата для анализа и стандартного препарата, соответственно.