Холина хлорид
C5H14ClNO 139,62
(2-Гидроксиэтил)триметиламмоний хлорид;
2-Гидрокси-N,N,N-триметилэтанамин хлорид [67-48-1].
ОПРЕДЕЛЕНИЕ
Холин хлорид содержит не более 99,0% и не более 100,5% холина хлорида (C5H14ClNO), в пересчете на безводный.
ИДЕНТИФИКАЦИЯ
• А. Инфракрасное поглощение<197K>
• B. Идентификационные тесты - Общие сведения, хлорид <191>: Раствор (1 из 20) соответствует требованиям.
АНАЛИЗА
• Процедура
Образец: 120 мг
Титриметрическая система
(См. Титриметрия <541>.)
Режим: Прямое титрование
Титрант: 0,1 N нитрат серебра VS.
Обнаружение конечной точки: потенциометрический
Бланк: 35 мл воды. Добавьте 3 капли уксусной кислоты.
Анализ: Растворите образец в 35 мл воды и добавьте 3 капли уксусной кислоты. Титровать титрантом.
Рассчитайте процентное содержание хлорида холина (C5H14ClNO) в взятой пробе:
Результат = [(V B) × N × F × 100]/Вт
V = объем титранта пробы (мл)
B = пустой объем титранта (мл)
N = нормальность титранта (мг-экв/мл)
F = коэффициент эквивалентности, 139,6 мг/м-экв.
W = вес образца (мг)
Критерии приемки: 99,0%-100,5% в пересчете на безводный газ.
ПРИМЕСИ
• Остаточные растворители<467>: Соответствует требованиям, за исключением того, что предел содержания 1,4-диоксана составляет 10 мкг/г.
• Остаток при возгорании<281>: не более 0,05%.
• Мышьяк, метод I<211>
Анализ: Добавьте 30 мл воды и 5 мл соляной кислоты, чтобы растворить образец.
Критерии приемки: не более 2 частей на миллион.
• Ведущий<251>
[Примечание-Используйте метиленхлорид вместо хлороформа для приготовления раствора для экстракции дитизона и стандартного раствора дитизона. ]
Раствор А: Перелейте 8,4 г раствора гидроксида натрия (1 к 2) в пластиковую бутылку, добавьте 100 мл гидроксида аммония и перемешайте.
Стандартный раствор: перенесите 1,0 мл разбавленного стандартного раствора свинца в делительную воронку, содержащую 25,0 мл воды.
Раствор образца: растворите 3,00 г холина хлорида в делительной воронке, содержащей 25,0 мл воды.
Анализ
Образцы: стандартный раствор и образец раствора.
Отдельно добавьте 6,0 мл раствора цитрата аммония и 3,0 мл раствора цианида калия к стандартному раствору и раствору образца. Каждый из полученных растворов экстрагируют три раза порциями по 5,0 мл экстракционного раствора дитизона, встряхивая в течение 60 с и сливая каждый экстракт в другой сепаратор. Объединенные растворы дитизона встряхивают в течение 30 с с 20,0 мл азотной кислоты (1 из 100) и выбрасывают слой метиленхлорида. Добавьте 6,0 мл раствора аммиака-цианида, 2 мл раствора А и 10 мл стандартного раствора дитизона и встряхивайте в течение 45 с. Дайте фазам разделиться и измерьте поглощение нижнего слоя при 510 нм с помощью подходящего спектрофотометра.
Критерии приемлемости: Оптическая плотность раствора образца не превышает оптической плотности стандартного раствора (не более 0,3 ppm).
• Тяжелые металлы, метод II<231>: не более 10 частей на миллион.
• Предел общего содержания аминов
Стандартный раствор: 500 мкг/мл гидрохлорида триметиламина в воде.
Раствор образца: перенесите 10,0 г холина хлорида в химический стакан с мешалкой с пластиковым покрытием, добавьте 170 мл воды и 30,0 мл гидроксида натрия ИР и перемешивайте до растворения.
Исходный раствор для пригодности системы: 10 мкг/мл гидрохлорида триметиламина в воде.
Раствор для проверки пригодности системы: перенесите 10,0 мл исходного раствора для проверки пригодности системы в химический стакан с мешалкой с пластиковым покрытием, добавьте 160 мл воды и 30,0 мл гидроксида натрия ИР и перемешивайте до растворения.
Электродная система: используйте газочувствительный, аммиачный индикаторный электрод с внутренним эталоном, подключенным к pH-метру, способному измерять потенциалы с минимальной воспроизводимостью ±0,1 мВ (см. pH 791).
Стандартная линия ответа: смешайте 30,0 мл гидроксида натрия ИР и 170 мл воды. Добавьте мешалку с пластиковым покрытием, вставьте электрод в раствор и запишите потенциал в мВ. Продолжайте перемешивать и с интервалом 5 минут добавляйте 0,200, 0,600, 1,00 и 2,00 мл стандартного раствора и записывайте потенциал после каждого добавления. Постройте логарифмы совокупных концентраций гидрохлорида триметиламина (0,50, 1,50, 2,50 и 5,00 мкг/мл) в зависимости от потенциала в мВ и определите наклон (S) стандартной линии ответа для электрода.
Пригодность системы
Пример: Решение по пригодности системы
Действуйте, как указано в разделе «Анализ», за исключением замены раствора образца раствором для проверки пригодности системы и в приведенной ниже формуле замены W на V, что равно 10 мл.
Требования пригодности: Общее изменение составляет не более 10 мВ для совокупного добавления 0,4 мл стандартного раствора; обнаруженное количество триметиламина гидрохлорида составляет 8,5-11,5 мкг/л.
Анализ
Образцы: стандартный раствор и образец раствора.
Промойте электрод, вставьте его в раствор пробы, перемешайте и запишите потенциал в мВ. Добавьте 0,100 мл стандартного раствора и запишите потенциал. Добавьте еще 0,100 мл стандартного раствора и запишите потенциал. [Примечание. Если общее изменение после второго добавления стандартного раствора составляет менее 10 мВ, добавьте третью аликвоту объемом 0,200 мл.]
Рассчитайте содержание, мкг/г, суммы аминов в виде гидрохлорида триметиламина в взятой порции пробы:
Результат = (CS × ВА)/[(F 1) × W]
CS = концентрация стандартного раствора (мкг/мл)
VA = общий объем стандартного раствора, добавленного к раствору образца (мл).
W = масса холина хлорида, взятого для приготовления раствора образца (г).
F = поправочный коэффициент, рассчитываемый по формуле:
F = антилогарифмический [(мВФ мВ0)/С]
мВФ = окончательное показание после добавления стандартного раствора (мВ)
мВ0 = начальное показание раствора пробы (мВ)
S = наклон стандартной линии отклика электрода.
Критерии приемлемости: не более 10 мкг/г.
• Хроматографическая чистота
Буферный раствор: 7,1 г/л безводного двухосновного фосфата натрия. Доведите pH фосфорной кислотой до 2,5.
Подвижная фаза: буферный раствор и ацетонитрил (7:3).
Стандартный раствор: перенесите не более 100 мг холина хлорида USP RS в флакон емкостью 24 мл с завинчивающейся крышкой и добавьте 400 мг 3,5-динитробензоилхлорида и 10 мл ацетонитрила. Закройте флакон, нагрейте до 55°С и продолжайте нагревание в течение 2 часов. Остудить до комнатной температуры и добавить 5 мл воды. Дать постоять 5 мин. Количественно перенесите раствор в мерную колбу емкостью 25 мл и разбавьте ацетонитрилом до нужного объема. Разбавьте объем этого раствора подвижной фазой, чтобы получить концентрацию 2,0 мкг/мл USP Choline Chloride RS.
Раствор образца: Перенесите 110 мг холина хлорида в флакон емкостью 24 мл с завинчивающейся крышкой. Сушить при 120 2 часа. Добавьте 400 мг 3,5-динитробензоилхлорида и 10 мл ацетонитрила. Закройте флакон, нагрейте до 55°С и продолжайте нагревание в течение 2 часов. Остудить до комнатной температуры и добавить 5 мл воды. Дать постоять 5 мин. Количественно перенесите раствор в мерную колбу емкостью 50 мл и разбавьте подвижной фазой до объема. Перенесите 2,0 мл раствора пипеткой в ​​мерную колбу емкостью 25 мл и разбавьте подвижной фазой до объема.
Хроматографическая система
(См. «Хроматография<621>, Пригодность системы».)
Режим: ЛК
Детектор: УФ 208 нм
Колонка: 4,6-мм × 25-см; упаковка L7
Температура колонки: 30
Скорость потока: 1,0 мл/мин.
Размер инъекции: 20 мкл
Пригодность системы
Образец: стандартное решение
Требования пригодности
Коэффициент мощности (к'): не более 2
Относительное стандартное отклонение: не более 5%, определенное по пику производного холина.
Анализ
Образцы: стандартный раствор и образец раствора.
Рассчитайте процентное содержание каждой примеси в принятой порции холина хлорида:
Результат = (rU/rS) × (CS/CU) × 100
rU = пиковый отклик для каждой примеси, за исключением производного холина и 3,5-динитробензойной кислоты из раствора образца.
rS = пиковый отклик для производного холина из стандартного раствора.
CS = концентрация хлорида холина USP RS в стандартном растворе (мг/мл).
CU = концентрация холина хлорида в растворе образца (мг/мл).
Критерии приемки
Отдельные примеси: не более 0,3%
Общее количество примесей: не более 2,0%
СПЕЦИАЛЬНЫЕ ИСПЫТАНИЯ
• pH<791>: 4,0-7,0, в растворе (1 из 10)
• Определение воды, метод I<921>: не более 0,5%
ДОПОЛНИТЕЛЬНЫЕ ТРЕБОВАНИЯ
• Упаковка и хранение: Хранить в хорошо закрытых контейнерах.
• Справочные стандарты Фармакопеи США<11>
USP Холина хлорид RS