Трегалоза
C12H22O11 342,30
C12H22O11·2H2O 378,33
α-D-глюкопиранозил α-D-глюкопиранозид.
Безводный [99-20-7].
Дигидрат [6138-23-4].
ОПРЕДЕЛЕНИЕ
Трегалоза представляет собой стабильный невосстанавливающий дисахарид с двумя молекулами глюкозы, связанными в конфигурации α,α-1,1. Его получают путем ферментативной конверсии пищевого крахмала. Содержит не более 97,0% и не более 102,0% C12H22O11 в пересчете на безводный.
ИДЕНТИФИКАЦИЯ
• А. Инфракрасное поглощение<197K>
• Б.
Раствор образца: 400 мг/мл трегалозы.
Анализ: Добавьте 0,4 мл раствора, содержащего 1-нафтол в 95% спирте (1 из 20), к 1 мл раствора образца. Аккуратно добавьте в раствор 2 мл серной кислоты.
Критерии приемки: На границе раздела двух растворов появляется фиолетовый цвет.
• С.
Раствор глицина: 40 мг/мл глицина.
Раствор образца: 40 мг/мл трегалозы.
Анализ: Добавьте 1 мл разбавленной соляной кислоты к 2 мл раствора образца. Дать постоять 20 минут при комнатной температуре. Добавьте к раствору образца 4 мл гидроксида натрия ИР и 2 мл раствора глицина. Нагрейте раствор в течение 10 мин в кипящей воде.
Критерии приемки: Коричневая окраска не проявляется.
АНАЛИЗА
• Процедура
Подвижная фаза: Вода
Стандартный раствор: 10 мг/мл Трегалозы RS согласно Фармакопее США, в пересчете на безводный раствор.
Раствор образца: 10 мг/мл трегалозы, в пересчете на безводный раствор.
Хроматографическая система
(См. «Хроматография<621>, Пригодность системы».)
Режим: ЛК
Детектор: показатель преломления
Колонка: 8-мм × 30-см; упаковка L58
Температура
Детектор: 40
Колонка: 80
Скорость потока: отрегулируйте так, чтобы время удерживания трегалозы составляло около 15 минут.
Размер инъекции: 20 мкл
Пригодность системы
Образец: стандартное решение
Требования пригодности
Относительное стандартное отклонение: не более 2,0%.
Анализ
Образцы: стандартный раствор и образец раствора.
Рассчитайте процент трегалозы (C12H22O11) в принятой порции трегалозы:
Результат = (rU/rS) × (CS/CU) × 100
rU = пиковый отклик раствора образца
rS = пиковый отклик стандартного раствора
CS = концентрация трегалозы RS согласно Фармакопее США в стандартном растворе (мг/мл).
CU = концентрация трегалозы в растворе образца (мг/мл).
Критерии приемки: 97,0%-102,0% в пересчете на безводный газ.
ПРИМЕСИ
• Остаток при прокаливании<281>: не более 0,1%, определено на 2,0 г трегалозы.
• Тяжелые металлы, метод I<231>
Проба: 4,0 г
Подготовка монитора: приготовьте 2,5 мл стандартного раствора свинца.
Критерии приемки: не более 5 частей на миллион.
• Родственные вещества
Подвижная фаза и хроматографическая система: Подготовьте, как указано в анализе.
Раствор образца: 10 мг/мл трегалозы.
Стандартный раствор: 0,1 мг/мл раствора образца.
Раствор для проверки пригодности системы: растворите 2,5 мл раствора образца, 25 мг мальтотриозы и 25 мг глюкозы и разбавьте водой до 10,0 мл.
Пригодность системы
Пример: Решение по пригодности системы
[Примечание - Относительное время удерживания мальтотриозы, трегалозы и глюкозы составляет около 0,9, 1,0 и 1,2 соответственно.]
Требования пригодности
Разрешение: не более 1,5 между трегалозой и мальтотриозой.
Относительное стандартное отклонение: не более 2,0% для пика трегалозы.
Анализ
Образцы: образец раствора и стандартный раствор.
Определите площади пиков для всех пиков.
Критерии приемлемости: Для раствора образца площади любых пиков, соответствующих мальтотриозе и другим полисахаридам и элюируемых перед трегалозой, составляют половину площади пика, соответствующего трегалозе, на хроматограмме стандартного раствора (0,5%). Площади любых пиков, соответствующих глюкозе и элюирующих после трегалозы, составляют не более половины площади пика, соответствующего трегалозе, на хроматограмме стандартного раствора (0,5%).
СПЕЦИАЛЬНЫЕ ИСПЫТАНИЯ
• Цвет и прозрачность раствора.
Раствор образца: 33 г трегалозы в 67 г только что вскипевшей воды.
Анализ
Используя подходящий спектрофотометр (см. Спектрофотометрия и рассеяние света 851), измерьте оптическую плотность раствора образца при 420 и 720 нм в кювете длиной 10 см. Поглощение раствора образца при 720 нм составляет не более 0,050.
Определите разницу поглощения:
Результат = A420 A720
A420 = поглощение раствора образца при 420 нм.
A720 = поглощение раствора образца при 720 нм.
Критерии приемлемости: Разница в поглощении составляет не более 0,100.
• Оптическое вращение, удельное вращение<781S>: от +197° до +201° при 20°.
Раствор образца: 100 мг/мл
• Тесты по подсчету микроорганизмов<61> и тесты на определенные микроорганизмы<62>: Общее количество аэробных микроорганизмов составляет не более 100 КОЕ/г, а общее общее количество плесени и дрожжей составляет не более 100 КОЕ/г. Соответствует требованиям тестов на отсутствие видов Salmonella и Escherichia coli.
• pH<791>
Раствор образца: 100 мг/мл
Критерии приемки: 4,5-6,5
• Определение содержания воды, метод I<921>: для безводной формы не более 1,0%; для дигидратной формы 9,0%-11,0%
Образец: 0,1 г
• Тест на бактериальные эндотоксины<85>: Если он помечен для использования при приготовлении парентеральных лекарственных форм, он также соответствует следующим требованиям. Уровень бактериальных эндотоксинов таков, что могут быть выполнены требования соответствующей фармакопейной статьи(ий), в которой используется трегалоза. Если на этикетке указано, что трегалоза должна быть подвергнута дальнейшей обработке во время приготовления инъекционных лекарственных форм, уровень бактериальных эндотоксинов таков, что могут быть выполнены требования соответствующей фармакопейной статьи о лекарственных формах, в которой используется трегалоза.
• Хлорид и сульфат, Хлорид<221>: Образец массой 2,0 мкг содержит не больше хлорида, чем соответствует 0,70 мл 0,01 М соляной кислоты (не более 0,0125%).
• Хлорид и сульфат, Сульфат<221>: Образец массой 2,0 мкг содержит не больше сульфата, чем соответствует 0,83 мл 0,005 М серной кислоты (не более 0,0200%).
• Содержание азота, метод I<461>
Проба: 5,0 г
Анализ: Действуйте, как указано в методе I, увеличивая количество серной кислоты, используемой для расщепления, до 30 мл и уменьшая количество раствора гидроксида натрия (2 из 5) до 45 мл.
Критерии приемки: не более 0,005%
• Растворимый крахмал
Раствор образца: 10% трегалоза (мас./об.)
Анализ: Добавьте в раствор пробы несколько капель йода ИР.
Критерии приемки: Никакого синего окрашивания.
ДОПОЛНИТЕЛЬНЫЕ ТРЕБОВАНИЯ
• Упаковка и хранение: Хранить в плотных контейнерах. Требования к хранению не указаны.
• Маркировка: Если трегалоза предназначена для использования при производстве инъекционных лекарственных форм, она имеет соответствующую маркировку. Если трегалозу необходимо подвергнуть дальнейшей обработке во время приготовления инъекционных лекарственных форм для обеспечения приемлемого уровня бактериальных эндотоксинов, она маркируется соответствующим образом.
• Справочные стандарты Фармакопеи США<11>
USP Эндотоксин RS
USP Глицерин RS
USP Трегалоза RS