Процедуры проверки
1. Внешний вид
-- Визуальный осмотр
2. Чистота (ВЭЖХ)
2.1 Инструмент
Высокоэффективная жидкостная хроматография, детектор PDA.
Электронные аналитические весы
2.2 Реагент
Ацетонитрил (хроматографическая степень чистоты), трифторуксусная кислота (хроматографическая степень чистоты)
2.3 Хроматографические условия
2.3.1 Колонка: YMC-ODS-AM, 5 мкл, 250х4,6 мм.
2.3.2 Длина волны обнаружения: INC220 нм
Скорость потока: 1,0 мл/мин.
Размер образца: 10 мкл (ссылка)
Разбавитель: ацетонитрил
Время сбора данных: 25.00мин.
2.4. Приготовление подвижной фазы
Подвижная фаза A (0,1% воды трифторуксусной кислоты): прецизионное поглощение. 2. Разбавьте 0 мл трифторуксусной кислоты водой до 2000 мл, хорошо перемешайте и дегазируйте;
Подвижная фаза B (0,1% ацетонитрилтрифторуксусной кислоты): точная абсорбция. 2,0 мл трифторуксусной кислоты разбавляли до 2000 мл ацетонитрилом, перемешивали и дегазировали;
2.5 Градиентная программа подвижной фазы
Время (мин) A% B%
0,00 90 10
13.00 10 90
18.00 10 90
18.01 90 10
23.00 90 10
2.6 Приготовление раствора образца
Взвесьте и растворите 0,1 г образца в ацетонитриле и разбавьте до 100 мл, хорошо встряхните для использования или той же концентрации. Подготовьте два образца параллельно.
2.7 Определение пробы
Анализируйте пробу в соответствии со следующей процедурой отбора проб:
Более 1 инъекции холостого раствора
1 образец раствора для стежков 1#
1 образец раствора для стежков 2#
2.8 Подсчет результатов
2.8.1 Для расчета чистоты ВЭЖХ использовали метод нормализации площади пика путем вычета пустого пространства.
2.8.2 Относительное среднее отклонение чистоты двух игл не должно превышать 1 %.
2.8.3 Если результаты обоих закачек соответствуют критериям приемки, за окончательный результат принимают среднюю чистоту.
3. Температура плавления -- RY-1 прибор для измерения температуры плавления
4. Метод определения потерь при сушке
4.1 Инструменты:
Электрическая термостатическая сушильная печь, баланс один на десять тысяч.
4.2 Процедура:
В плоской бюксе с притертой крышкой, постоянным весом и пересушенной, взвешивают 1 грамм образца (с точностью до 0,0001 грамма). Образец следует равномерно разложить на дне бюксы толщиной не более 10 мм, поместить в электрическую сушильную печь с постоянной температурой, высушить при 105-110 ℃ в течение 3 часов, а затем перенести в сушильную камеру, остудить до комнатной температуры и взвесить.
Расчет: Потеря сухой массы %= (M1-M2) ÷M×100.
Где: М1: масса образца и бюксы до сушки, г.
М2: Масса образца и бюксы после высыхания, г
М: Масса образца, грамм
5. Удельная ротация
-- Удельное вращение измеряется в соответствии с GB/T613-1988.
Подготовка образца: 0,5000 г образца точно взвешивали и переносили в чистую и сухую мерную бутыль емкостью 50 мл с 20 мл этилацетата. Бутылку закупорили и встряхнули, чтобы растворить этилацетат.
Тест: перед тестом отрегулируйте ноль гироскопа, затем заполните пробирку раствором образца, запишите угол отклонения и рассчитайте удельное вращение образца, используя следующую формулу.
[α]20/D= (r×50) ÷(Д×Ш)
Где:
[α]20/D: Удельное вращение раствора образца при 25℃.
r: Вращение, наблюдаемое при 25 ℃ для раствора образца.
50: Подготовьте объем раствора образца (мл).
w: Вес образца (г)
L: Длина оптической трубки (дм)
6. Анализ TCL
Подготовка образца: образец массой 0,5000 г точно взвешивали и помещали в чистую и сухую мерную бутыль емкостью 50 мл, добавляли 40 мл EtoH, бутыль закрывали крышкой и встряхивали до растворения, а затем разбавляли до шкалы EtoH.
Приготовление контрольного образца: образец массой 0,5000 г точно взвешивали и помещали в чистую и сухую мерную бутыль емкостью 50 мл, добавляли 40 мл воды и 2 капли 6н. Затем возьмите 0,5 вышеуказанной жидкости и разбавьте ее этанолом в бутылке емкостью 100 мл до эталонного образца с содержанием аминокислотных остатков 1,0%.
Образцы объемом 10 микролитров были взяты с помощью шприца для микроотбора и образцы были помещены на силиконовую пластину GF254. В качестве точек сравнения были взяты точечные планшеты емкостью 5 микролитров, 10 микролитров и 15 микролитров соответственно.
Проявитель: н-бутанол: ледяная уксусная кислота: вода = 4:1:1.
Проявитель цвета: 5% раствор нингидрина в метаноле.
Операция по проявлению цвета: сначала высушите проявленную пластину силикагеля феном, затем окуните ее в 5% раствор нингидрина в метаноле, затем высушите феном и запекайте при высокой температуре в электрической печи для проявления цвета.
Решение: Посмотрите на время окрашивания продукта, размер пятна, концентрацию цвета и сравнение с контрольным продуктом, сделайте вывод, что оно находится в этом диапазоне.