Гемцитабина гидрохлорид
C9H11F2N3O4·HCl 299,66
Цитидин, 2'-дезокси-2',2'-дифтор-, моногидрохлорид.
2'-Дезокси-2',2'-дифторцитидина моногидрохлорид (β-изомер) [122111-03-9].
» Гемцитабина гидрохлорид содержит не менее 97,5 процентов и не более 101,5 процентов C9H11F2N3O4·HCl, рассчитанных на основе «как есть».
[Внимание - Гемцитабина гидрохлорид является мощным цитотоксическим агентом. Следует проявлять особую осторожность, чтобы не вдыхать частицы и не подвергать их воздействию на кожу.]
Упаковка и хранение-Консервы в герметичных емкостях.
Маркировка-Если он предназначен для использования при приготовлении инъекционных лекарственных форм, на этикетке указывается, что он стерилен или должен быть подвергнут дальнейшей обработке во время приготовления инъекционных лекарственных форм.
Справочные стандарты USP<11>-
Фармакопея США Цитозин RS
USP Эндотоксин RS
USP гемцитабина гидрохлорид RS
Идентификация-
A: Инфракрасное поглощение<197K>.
B: Соответствует требованиям испытаний на хлориды<191>.
Удельное вращение<781S>: от +43 до +50, при 20.
Тестовый раствор: 10 мг на мл.
pH<791>: от 2,0 до 3,0, в растворе, содержащем 10 мг на мл.
Остаток при прокаливании<281>: не более 0,1%.
Тяжелые металлы, Метод I<231>: 0,001%.
Хроматографическая чистота-
Решение А - Действуйте, как указано для мобильной фазы анализа.
Раствор B-Приготовьте отфильтрованный и дегазированный метанол.
Подвижная фаза - Используйте переменные смеси растворов A и B, как указано в разделе «Хроматографическая система». При необходимости внесите коррективы (см. «Пригодность системы», раздел «Хроматография 621»).
Раствор для проверки пригодности системы - Действуйте, как указано в анализе.
Стандартный раствор - Растворите точно взвешенное количество гемцитабина гидрохлорида USP и цитозина RS USP в воде и разбавьте количественно, а при необходимости поэтапно, чтобы получить раствор с известной концентрацией около 2 мкг на мл каждого из них.
Испытательный раствор - Перенесите примерно 50 мг гемцитабина гидрохлорида (точно взвешенного) в мерную колбу емкостью 25 мл, растворите в ней воду, разбавьте ее до нужного объема и перемешайте.
Хроматографическая система (см. Хроматография 621)-Действуйте, как указано в разделе «Анализ». Хроматограф программируют следующим образом.
Время (минуты) Раствор А (%) Раствор Б (%) Элюирование
0–8 97 3 изократический
8–13 97®50 3®50 линейный градиент
13–20 50 50 изократический
20–25 50®97 50®3 восстановление равновесия
Хроматографируйте раствор пригодности системы и записывайте пиковые ответы, как указано в процедуре: относительное время удерживания составляет около 0,5 для аномера гемцитабина и 1,0 для гемцитабина; разрешение R между аномером гемцитабина и гемцитабином составляет не менее 8,0; а хвостовой фактор для гемцитабина не превышает 1,5. Хроматографируйте стандартный раствор и записывайте пиковые ответы, как указано в процедуре: относительное время удерживания составляет около 0,1 для цитозина и 1,0 для гемцитабина; относительное стандартное отклонение для повторных инъекций составляет не более 2,0%.
Процедура - Отдельно введите объем (около 20 мкл) стандартного раствора и тестируемого раствора в хроматограф, запишите хроматограмму и измерьте все пиковые реакции. Рассчитайте процентное содержание цитозина в принятой порции гемцитабина по формуле:
2,5(Cc/W)(rt/rs)
где Cc — концентрация цитозина RS согласно Фармакопее США в стандартном растворе, мкг на мл; W — масса принятого гемцитабина, мг; rt — пик реакции на цитозин в тестируемом растворе; rs – реакция на цитозин в Стандартном растворе: цитозина обнаружено не более 0,1%. Рассчитайте процентное содержание каждой примеси, кроме цитозина, в принятой порции гемцитабина по формуле:
2,5(Cs/W)(ri/rs)
где Cs — концентрация гемцитабина гидрохлорида USP RS в стандартном растворе, мкг на мл; W — масса принятого гемцитабина, мг; ri — пиковый отклик для каждой примеси в тестируемом растворе; rs — реакция на гемцитабин в Стандартном растворе: обнаруживается не более 0,1% аномера гемцитабина или любой другой индивидуальной примеси; а сумма всех примесей не более 0,2%. Исключите из суммы всех примесей любые пики, находящиеся ниже предела количественного определения (0,02%).
Другие требования - Если на этикетке указано, что гемцитабина гидрохлорид стерилен, он соответствует требованиям по бактериальным эндотоксинам и стерильности, предъявляемым к гемцитабину для инъекций. Если на этикетке указано, что гемцитабина гидрохлорид необходимо подвергнуть дальнейшей обработке при приготовлении инъекционных лекарственных форм, он соответствует требованиям к бактериальным эндотоксинам, указанным в разделе «Гемцитабин для инъекций».
анализ-
Подвижная фаза - Приготовьте профильтрованный и дегазированный раствор, содержащий 13,8 г одноосновного фосфата натрия и 2,5 мл фосфорной кислоты в 1000 мл воды. [примечание-РН этого раствора составляет от 2,4 до 2,6. ]
Раствор для проверки пригодности системы - Перенесите около 10 мг гемцитабина гидрохлорида в небольшой флакон, добавьте 4 мл раствора, содержащего 168 мг гидроксида калия на мл метанола, плотно закройте крышкой и обработайте ультразвуком. Нагревайте при температуре 55°С в течение 6–16 часов, дайте остыть и перенесите содержимое в мерную колбу емкостью 100 мл, последовательно промывая 1% (по объему) фосфорной кислотой. Разбавьте 1% фосфорной кислотой до необходимого объема и перемешайте. [примечание-Этот раствор содержит около 0,02 мг на мл α-аномера гемцитабина.]
Стандартное приготовление - Растворите точно взвешенное количество USP гемцитабина гидрохлорида RS в воде и разбавьте количественно, а при необходимости поэтапно, водой, чтобы получить раствор с известной концентрацией около 0,1 мг на мл.
Подготовка к анализу - Перенесите около 20 мг гемцитабина гидрохлорида, точно взвешенного, в мерную колбу емкостью 200 мл, растворите в ней, разбавьте водой до нужного объема и перемешайте.
Хроматографическая система (см. Хроматография<621>)-Жидкостный хроматограф оснащен детектором 275-нм и колонкой размером 4,6-мм × 25-см, содержащей насадку L7 5-мкм. Скорость потока составляет около 1,2 мл в минуту. Хроматографируйте раствор пригодности системы и записывайте пиковые ответы, как указано в процедуре: разрешение R между аномером гемцитабина и гемцитабином составляет не менее 8,0; а фактор хвоста, определенный по гемцитабину, составляет не более 1,5. Хроматографируйте стандартный препарат и записывайте пиковые ответы, как указано в процедуре: относительное стандартное отклонение для повторных инъекций составляет не более 1,0%.
Процедура - Отдельно введите в хроматограф равные объемы (около 20 мкл) стандартного препарата и препарата для анализа, запишите хроматограммы и измерьте отклики основных пиков. Рассчитайте количество, в мг, C9H11F2N3O4·HCl в взятой порции гемцитабина гидрохлорида по формуле:
200С(РУ/РС)
где C — концентрация гемцитабина гидрохлорида RS в мг на мл в стандартном препарате; и rU и rS представляют собой пиковые ответы, полученные от препарата для анализа и стандартного препарата, соответственно.