ОПРЕДЕЛЕНИЕ
Аргинин содержит не менее 98,5% и не более 101,0% эквивалента (S)-2-амино-5-гуанидинопентановой кислоты в пересчете на сухое вещество.
ПЕРСОНАЖИ
Внешний вид: белый или почти белый кристаллический порошок или бесцветные кристаллы, гигроскопичен. Растворимость: свободно растворим в воде, очень мало растворим в этаноле (96 процентов).
ИДЕНТИФИКАЦИЯ
Первая идентификация: А, С.
Вторая идентификация: A,B,D,E.
А. Соответствует тесту на удельное оптическое вращение (см. «Испытания»).
Б. Раствор S (см. Испытания) является сильнощелочным (2.2.4).
В. Исследуют методом инфракрасной абсорбционной спектрофотометрии (2.2.24), сравнивая со спектром, полученным с помощью аргининового CRS. Исследуют вещества, приготовленные в виде дисков.
D. Изучите хроматограммы, полученные в тесте на нингидрин-положительные вещества. Основное пятно на хроматограмме, полученной с помощью тестируемого раствора (б), аналогично по положению, цвету и размеру основному пятну на хроматограмме, полученному с раствором сравнения (а).
Д. Около 25 мг растворяют в 2 мл воды Р. Прибавляют 1 мл раствора α-нафтола Р и 2 мл смеси равных объемов раствора гипохлорита натрия крепкого Р и воды. Появляется красный цвет.
ИСПЫТАНИЯ
Раствор S. Растворить в 2,5 г дистиллированной воды и разбавить до 50 мл тем же растворителем.
Внешний вид раствора. Раствор S прозрачный (2.2.1) и окрашен не более интенсивно, чем раствор сравнения BY6 (2.2.2, Метод II).
Удельное оптическое вращение (2.2.7). 2,00 г растворяют в кислоте хлористоводородной Р1 и доводят объем этой же кислотой до 25,0 мл. Удельное оптическое вращение составляет от +25,5 до +28,5, рассчитанное по высушенному веществу.
Нингидрин-положительные вещества. Исследуют методом тонкослойной хроматографии (2.2.27), используя пластинку силикагеля R для ТСХ.
Тестовое решение (а). 0,10 г испытуемого вещества растворяют в разбавленной соляной кислоте и разбавляют той же кислотой до 10 мл.
Тестовый раствор (б). 1 мл испытуемого раствора (а) разбавляют водой Р до 50 мл.
Эталонный раствор (а). 10 мг аргинина CRS растворяют в 0,1 М соляной кислоте и разбавляют той же кислотой до 50 мл.
Эталонный раствор (б). 5 мл исследуемого раствора (б) разбавляют до 20 мл водой Р.
Эталонный раствор (в). 10 мг аргинина CRS и 10 мг лизина гидрохлорида CRS растворяют в 0,1 М соляной кислоте и разбавляют той же кислотой до 25 мл.
Нанесите на пластинку по 5 мкл каждого раствора. Дайте пластине высохнуть на воздухе. Проявляют на протяжении 15 см смесью 30 объемов аммиака концентрированного Р и 70 объемов 2-пропанола Р. Пластинку сушат при температуре от 100 до 105°С до полного исчезновения аммиака. Опрыскивают раствором нингидрина Р и нагревают при температуре от 100°С до 105°С в течение 15 мин. Любое пятно на хроматограмме, полученной с испытуемым раствором (а), за исключением основного пятна, не более интенсивно, чем пятно на хроматограмме, полученное с раствором сравнения (б) (0,5%). Тест недействителен, если на хроматограмме, полученной с эталонным раствором (с), не видно двух четко разделенных пятен.
Хлориды (2.4.4). К 5 мл раствора S прибавляют 0,5 мл кислоты азотной разбавленной Р и доводят объем воды Р до 15 мл. Раствор соответствует предельному испытанию на хлориды (200 ppm).
Сульфаты (2.4.13). К 10 мл раствора S прибавляют 1,7 мл кислоты соляной разбавленной P и доводят объем воды дистиллированной P до 15 мл. Раствор соответствует предельному испытанию на сульфаты (300 ppm).
Аммоний (2.4.1). 50 мг соответствует предельному тесту B на содержание аммония (200 частей на миллион). Приготовьте стандарт, используя 0,1 мл стандартного раствора аммония (100 ppm NH4) Р.
Железо (2.4.9). В делительной воронке растворяют 1,0 г в 10 мл кислоты соляной разбавленной Р. Встряхивают с тремя порциями по 10 мл метилизобутилкетона Р1, каждый раз встряхивая по 3 мин. К объединенным органическим слоям добавляют 10 мл воды и встряхивают в течение 3 мин. Водный слой соответствует предельному тесту на содержание железа (10 частей на миллион).
Тяжелые металлы (2.4.8). 2,0 г растворяют в воде Р и доводят до 20 мл тем же растворителем. 12 мл раствора соответствуют предельному тесту А на содержание тяжелых металлов (10 ppm). Приготовьте стандарт, используя стандартный раствор свинца (1 ppm Pb) R.
Потери при сушке (2.2.32). Не более 0,5 процента, определяется на 1000 г путем сушки в печи при температуре 105℃.
Сульфатированная зола (2.4.14). Не более 0,1 процента, определяемого на 1,0 г.
АНАЛИЗА
0,150 г растворяют в 50 мл воды Р. Используя 0,2 мл смешанного раствора метилового красного индикатора Ras, титруют 0,1 М соляной кислотой до изменения окраски с зеленой на фиолетовую-красную.
1 мл 0,1 М соляной кислоты эквивалентен 17,42 мг C6H14N4O2.
ХРАНЕНИЕ
Хранить в защищенном от света месте.