Лактобионовая кислота
C12H22O12 (кислотная форма) 358,3 [96-82-2].
C12H20O11 (-лактон) 340,3 [5965-65-1].
4-O--Галактопиранозил-d-глюконовая кислота.
ОПРЕДЕЛЕНИЕ
Лактобионовая кислота представляет собой смесь в переменных пропорциях 4-O-d-галактопиранозил-d-глюконовой кислоты и 4-O-d-галактопиранозил-d-глюконо-1,5-лактона. Он содержит не более 98,0% и не более 102,0% в пересчете на безводный.
ИДЕНТИФИКАЦИЯ
• А. Инфракрасное поглощение <197K>: [Примечание-Если полученные спектры показывают различия, растворите испытуемое вещество и RS лактобионовой кислоты USP отдельно в воде, высушите при температуре 105 и запишите новые спектры, используя остатки.]
• Б. Тонкослойная хроматография<621>
Стандартный раствор: 10 мг/мл лактобионовой кислоты USP RS.
Раствор образца: 10 мг/мл лактобионовой кислоты.
Адсорбент: хроматографическая смесь силикагеля со средним размером частиц 10-15 мкм (пластинки ТСХ).
Проявляющий растворитель: метанол, этилацетат, гидроксид аммония и вода (2:1:1:1).
Объем применения: 5 мкл
Распыляемый реагент: Медленно добавьте 10 мл серной кислоты примерно к 40 мл воды. Перемешайте, дайте остыть. Разбавьте водой до 100 мл и перемешайте. Добавьте 2,5 г молибдата аммония и 1 г сульфата церия и встряхивайте в течение 15 мин до растворения.
Анализ: Проявите хроматограммы до тех пор, пока фронт растворителя не переместится примерно на три четверти длины пластинки, и дайте высохнуть. Опрыскайте пластину реагентом Spray и дайте ей высохнуть. Повторите еще два раза, нагрейте при 110°С в течение 15 мин и осмотрите.
Критерии приемки: Основное пятно раствора образца аналогично по положению и цвету основному пятну раствора стандарта.
АНАЛИЗА
Изменить на чтение:
• Процедура
Образец: NF30 0,350 г лактобионовой кислоты NF30.
Анализ: Растворите образец в 50 мл воды, не содержащей углекислого газа, предварительно нагретой до 30,NF30. Немедленно титруйте 0,1 NNF30 гидроксидом натрия и потенциометрически определите две точки эквивалентности. (См. Титриметрия 541.)
Каждый мл 0,1 N гидроксида натрия, израсходованный до первой точки эквивалентности, эквивалентен 35,83 мг C12H22O12 (соответствует кислотной форме), а каждый мл 0,1 N гидроксида натрия, израсходованный между первой и второй точками эквивалентности, эквивалентен 34,03 мг C12H20O11 (соответствует -лактоновой форме).
Рассчитайте содержание лактобионовой кислоты, выраженное в процентах, как сумму обоих результатов.NF30.
Критерии приемки: 98,0%-102,0% в пересчете на безводный.
ПРИМЕСИ
• Тяжелые металлы<231>
Тиоацетамидный реактив: к 0,2 мл тиоацетамида ИР прибавляют 1 мл смеси 5 мл воды, 15 мл 1 М гидроксида натрия и 20 мл глицерина. Нагревать на водяной бане 20 с. [Примечание-Приготовьте непосредственно перед использованием.]
Исходный раствор нитрата свинца: Приготовьте, как указано для специальных реагентов для определения тяжелых металлов<231>.
Стандартный раствор: в день использования разбавьте 2,0 мл исходного раствора нитрата свинца (10 ppm Pb) в воде до 30 мл.
Раствор образца: растворите 1 г лактобионовой кислоты в воде до 30 мл.
Подготовьте фильтрационный аппарат, приспособив цилиндр шприца емкостью 50 мл без поршня к опоре, содержащей на пластине мембранный фильтр с размером пор 3 мкм и над ним предварительный фильтр.
Перенесите раствор пробы в цилиндр шприца, установите поршень на место, а затем равномерно надавите на него, пока вся жидкость не будет отфильтрована. Открывая опору и снимая предварительный фильтр, убедитесь, что мембранный фильтр не загрязнен посторонними примесями. Если это не так, замените его другим мембранным фильтром и повторите операцию в тех же условиях.
Анализ: К предварительному фильтрату добавьте 2 мл ацетатного буфера с pH 3,5. Перемешайте и добавьте 1,2 мл реагента тиоацетамида. Немедленно перемешайте, дайте постоять 10 мин и снова отфильтруйте, как описано выше, но меняя порядок фильтров, при этом жидкость сначала проходит через мембранный фильтр, а затем проходит через предварительный фильтр. Фильтрацию необходимо проводить медленно и равномерно, оказывая умеренное и постоянное давление на поршень шприца. После завершения фильтрации откройте подставку, снимите мембранный фильтр и высушите фильтровальной бумагой. Параллельно обрабатывайте стандартный раствор так же, как и раствор образца.
Критерии приемлемости: Цвет пятна раствора образца не интенсивнее цвета пятна стандартного раствора (не более 20 ppm).
СПЕЦИАЛЬНЫЕ ИСПЫТАНИЯ
• Определение содержания воды, метод Ia<921>
Пример решения:
0,50 г в смеси метанола и формамида (2:1)
Критерии приемки: не более 5,0%
• Внешний вид решения
Раствор образца: 120 мг/мл лактобионовой кислоты.
Стандартный исходный раствор: внесите пипеткой 24,0 мл хлорида железа CS и 6,0 мл хлорида кобальта CS в мерную колбу емкостью 100 мл. Разбавьте 1% (мас./об.) соляной кислотой до нужного объема.
Эталонный раствор: Внесите пипеткой 12,5 мл стандартного маточного раствора в мерную колбу емкостью 100 мл. Разбавьте 1% (мас./об.) соляной кислотой до нужного объема.
Критерии приемки: Раствор образца прозрачный и окрашен не более интенсивно, чем раствор сравнения.
• Оптическое вращение, удельное вращение<781S>
Раствор образца: 10 мг/мл лактобионовой кислоты. Дать постоять 24 часа.
Критерии приемки: от +23,0 до +29,0 (безводное вещество)
• Сокращение потребления сахара
Раствор образца: растворите 5,0 г лактобионовой кислоты в 25 мл воды при слабом нагревании и охладите.
Анализ: К раствору образца добавьте 20 мл цитрата меди ИР и несколько стеклянных шариков. Нагрейте так, чтобы кипение началось через 4 мин, и поддерживайте кипение в течение 3 мин. Быстро охладить и добавить 100 мл 2,4% раствора ледяной уксусной кислоты и 20,0 мл 0,025 М йода VS. При непрерывном встряхивании добавьте 25 мл смеси 6 мл соляной кислоты и 94 мл воды. После растворения осадка титруют избыток йода 0,05 М тиосульфатом натрия ТР, используя 1 мл крахмала ИР, добавленного ближе к концу титрования в качестве индикатора.
Критерии приемлемости: требуется не более 12,8 мл 0,05 М тиосульфата натрия VS, что соответствует не более 0,2% редуцирующих сахаров в пересчете на глюкозу.
• Предметы ботанического происхождения, всего золы 561: не более 0,2%.
ДОПОЛНИТЕЛЬНЫЕ ТРЕБОВАНИЯ
• Упаковка и хранение: Хранить в хорошо закрытых контейнерах.
• Справочные стандарты Фармакопеи США<11>
Фармакопея США Лактобионовая кислота RS