ланолин
Ланолин — это очищенное воскоподобное вещество из шерсти овец Ovis aries Linné (семейство Bovidae), которое было очищено, обесцвечено и дезодорировано. В нем содержится не более 0,25 процента воды. Он может содержать не более 0,02 процента подходящего антиоксиданта.
Упаковка и хранение- Хранить в хорошо закрытых контейнерах, желательно при контролируемой комнатной температуре.
Маркировка- На этикетке указано, что его нельзя использовать в неразбавленном виде.
Справочные стандарты USP<11>-
USP Ланолин RS
Диапазон плавления, класс II<741>: от 38 до 44, определяется на образце для испытаний, предварительно охлажденном до температуры от 8 до 10.
Кислотность<401>-Свободных кислот в 10,0 г требуется для нейтрализации не более 2,0 мл 0,10 N гидроксида натрия.
Щелочность-2,0 г растворяют в 10 мл эфира и добавляют 2 капли фенолфталеина ИР: жидкость не окрашивается в красный цвет.
Вода- Растворите около 25 г (точно взвешенного) в 75 мл смешанного растворителя, состоящего из 3 частей хлороформа и 2 частей метанола, и разбавьте смешанным растворителем до 100,0 мл. Определите содержание воды в порции объемом 10,0 мл, как указано в разделе «Определение содержания воды, метод I<921>». Выполните холостое определение на 10,0 мл смешанного растворителя и внесите необходимые поправки. Встречается не более 0,25%.
Остаток при прокаливании<281>: не более 0,1%.
Водорастворимые кислоты и щелочи- Нагрейте 10,0 г с 50 мл воды на паровой бане, постоянно помешивая смесь до расплавления ланолина: при охлаждении жир полностью отделяется, оставляя слой воды почти прозрачным и нейтральным по отношению к лакмусам. Сохраните слой воды.
Водорастворимые окисляющиеся вещества- Порция раствора объемом 10 мл из теста на водорастворимые кислоты и щелочи не обесцвечивает полностью 50 мкл 0,10 N перманганата калия в течение 10 минут.
Хлорид<221>- 20 мл спирта с 1,0 г ланолина кипятят под обратным холодильником, охлаждают, добавляют 1 мл 2 н азотной кислоты, фильтруют и к фильтрату добавляют 5 капель раствора нитрата серебра в спирте (1 к 50): образовавшаяся мутность не превышает мутности контрольного образца, к которому добавлено 0,50 мл 0,020 н соляной кислоты (0,035%).
Аммиак- К порции раствора из пробы на водорастворимые кислоты и щелочи объемом 10 мл прибавляют 1 мл 1 N гидроксида натрия и кипятят: пары не окрашиваются в красный лакмус-синий цвет.
Йодное число<401>: от 18 до 36, определяется на образце от 780 до 820 мг.
Инородные вещества- [примечание- На протяжении всего теста используйте реагенты и растворители, не содержащие пестицидов. Эталонные материалы пестицидов для использования при приготовлении стандартов могут быть получены из любого коммерческого источника.* ]
Стандартные стандартные решения- Приготовьте исходные растворы в гексане, каждый из которых имеет известную концентрацию 100 мг эталонного пестицида на литр. [примечание - Концентрированные исходные растворы можно хранить в темноте в стеклянных - контейнерах с пробками в холодильнике при температуре от 2 до 5 в течение 1 года. Большинство пестицидов можно растворить непосредственно в гексане; однако изомеры гексахлорциклогексана и пестициды группы ДДТ могут потребовать первоначального растворения в минимальном объеме ацетона с последующим разбавлением гексаном до указанной концентрации.]
Стандартная подготовка- Количественно разбавьте точно отмеренные объемы исходных растворов стандарта гексаном и объедините их, чтобы получить составной препарат стандарта, имеющий концентрации, указанные в таблице 1. Храните составной препарат стандарта в стеклянном контейнере с притертой пробкой в ​​темноте при температуре от 2 до 5 минут и заменяйте его каждые 2 месяца. [примечание-При необходимости можно приготовить два или более отдельных составных стандартных препарата, каждый из которых предпочтительно содержит не более 8 эталонных пестицидов. Эталонные пестициды следует выбирать для составных стандартных препаратов на том основании, что относительные времена удерживания (см. Таблицу 1) достаточно различаются, так что можно ожидать, что пики на хроматограммах не будут перекрываться, и их следует выбирать и комбинировать соответствующим образом для используемой хроматографической системы и детектора.]
Система очистки гель-проникающей хроматографии -
элюент - Приготовьте смесь метиленхлорида и гексана (1:1).
Таблица 1
Стандартный препарат (концентрация в мкг на мл) Относительное время удерживания (относительно 1,0 для хлорпирифоса)
Эталонный пестицид* Электрон - детектор захвата Пламя - фотометрический детектор System I System II
Тетрахлорнитробензол [TCBN] 0,05 - 0,29 0,24
альфа-гексахлорциклогексан (альфа-BHC) 0,05 - 0,40 0,35
бета-гексахлорциклогексан (бета-BHC) 0,30 - 0,43 0,56
Гексахлорбензол (ГХБ) 0,05 - 0,45 0,33
гамма Гексахлорциклогексан (линдан) 0,05 - 0,48 0,41
Пропетамфос - 0,30 0,48 0,42
Диазинон - 0,20 0,52 0,40
Дихлофентион 0,10 0,20 0,67 0,56
Роннель 0,30 0,40 0,81 0,66
Гептахлор 0,10 - 0,83 0,60
Малатион - 0,40 0,91 1,05
Хлорпирифос 0,30 0,30 1,00 1,00
Олдрин 0.20 - 1,05 0,76
Пиримифос Этил - 0,40 1,14 1,14
Хлорфенвинфос Z 0,40 0,40 1,17 1,40
Гептахлорэпоксид 0,20 - 1,29 1,17
Хлорфенвинфос Е 0,40 0,50 1,30 1,51
Бромофос этил 0,40 0,50 1,51 1,45
1,1¢-дихлор-2-(2-хлорфенил)-2-(4-хлорфенил)этен (о,п-ДДЭ) 0,30 - 1,55 1,51
1,1¢-дихлор-2-(4-хлорфенил)-2-(4-хлорфенил)этен (п,п-ДДЭ) 0,30 - 1,88 1,86
Стирофос 0,60 0,80 1,58 1,97
альфа-эндосульфан 0,40 - 1,63 1,47
1,1¢-дихлор-2-(2-хлорфенил)-2-(4-хлорфенил)этан (о,п-ТДЭ) 0,40 - 1,90 2,19
Дильдрин 0.30 - 1,91 1,84
Эндрин 0.40 - 2,13 2,29
бета-эндосульфан 0,40 - 2,19 2,77
1,1-дихлор-2,2-бис(4-хлорфенил)этан (п,п-ТДЭ) 0,40 - 2,41 2,87
1,1,1-трихлор-2-(2-хлорфенил)-2-(4-хлорфенил)этан (о,п-ДДТ) 0,40 - 2,55 2,70
Этион 1,00 0,40 2,56 3,36
Карбофенотион 0,80 1,00 2,94 3,70
1,1,1-трихлор-2,2-бикс(4-хлорфенил)этан (п,п¢-ДДТ) 0,50 - 3,13 3,50
Метоксихлор 0,60 - 4,70 7,20
Карбофенотионсульфон 5.00 - 5.10 9.20
Карбофенотион Сульфоксид 5.00 - 5.40 10.00
* Подходящие материалы можно получить в компании Chem Service, 660 Tower Lane, P.O. Box 3108, Вестчестер, Пенсильвания 19381-3108 или Greyhound, 88 Grange Road West, Биркенхед, Мерсисайд, L43 4XF, Англия, Великобритания.
Аппарат - Гель-проникающий хроматограф оснащен колонкой размером 25 мм × 50 см, заполненной суспензией 35 г шариков сополимера стирола с дивинилбензолом, спрессованных до длины слоя примерно 20 см. Элюант закачивают со скоростью около 5 мл в минуту при рабочем давлении от 8 до 11 фунтов на квадратный дюйм. Настройте хроматограф, настроив его на отбрасывание фракции, элюирующейся от 0 до 12 минут, соберите фракцию, элюирующую от 12 до 32 минут, и промывайте в течение 2 минут, отбрасывая промытую фракцию.
Пригодность системы-
Элюирование ланолина - Растопите подходящее количество ланолина и пропустите через рифленую фильтровальную бумагу в контейнер. Перенесите около 6,0 г теплого отфильтрованного ланолина (точно взвешенного) в мерную колбу емкостью 50 мл. Разбавьте элюантом до объема, перемешайте и отфильтруйте. Перенесите 5,0 мл этого раствора в колонку для гель-проникающей хроматографии и элюируйте элюантом. Соберите 100 мл эффлюента колонки в тарированные стаканы с шагом 10 мл. Выпарите растворитель, охладите, взвесьте стаканы и их содержимое и рассчитайте количество ланолина, элюируемого на каждые 10 мл. Колонка пригодна, если не менее 96% ланолина элюируется в первых 60 мл.
элюирование пестицида из ланолина - Растворите подходящие количества диазинона, диклофентиона, бромофосэтила, линдана и дильдрина в гексане, чтобы получить стандартный раствор с концентрацией в каждом мл 0,4, 0,4, 1,0, 0,1 и 0,6 мкг соответственно. Перенесите 5,0 мл этого раствора в мерную колбу емкостью 10 мл, содержащую 1 г ланолина USP RS, разбавьте метиленхлоридом до объема и перемешайте. Перенесите 5 мл этого раствора в колонку для гель-проникающей хроматографии и элюируйте 160 мл элюанта. Отбросьте первую фракцию объемом 60 мл и соберите следующую фракцию объемом 100 мл (от 60 до 160 мл). Эту собранную фракцию перенесите в концентратор с градуированной колбой для сбора, добавьте 50 мл гексана и концентрируйте выпариванием до 5 мл. Введите около 5 мкл этой фракции в хроматографы, описанные в разделах «Хроматографическая система I» и «Хроматографическая система II», запишите хроматограммы и измерьте высоту пиков, полученных от пяти пестицидов в стандартном растворе. Рассчитайте степень извлечения каждого из пяти пестицидов, используемых в обогащенном растворе USP Lanolin RS. Приготовьте тестируемый раствор, смешав гексан со стандартным раствором (1:1). Введите 5 мкл тестируемого раствора в хроматографы, описанные в разделах «Хроматографическая система I» и «Хроматографическая система II», запишите хроматограммы и измерьте высоту пиков пяти пестицидов на хроматограмме тестируемого раствора. Сравните высоты пиков, полученных из фракции стандартного раствора, с высотами пиков соответствующих пестицидов, полученных из испытуемого раствора: извлекается не менее 85% добавленных количеств каждого из пяти пестицидов.
Приготовление теста - Около 6 г ланолина, точно взвешенного и предварительно расплавленного до жидкой формы путем нагревания на горячей водяной бане, если необходимо, переносят в мерную колбу емкостью 50 мл, растворяют в 25 мл элюанта, разбавляют элюантом до объема, перемешивают и фильтруют. Перенесите 5,0 мл этого раствора в колонку и элюируйте 160 мл элюанта. Выбросьте первую фракцию объемом 60 мл и соберите оставшуюся фракцию в подходящий испаритель. Концентрируют выпариванием на паровой бане примерно до 3 мл, добавляют примерно 50 мл гексана и снова упаривают, чтобы удалить все следы метиленхлорида, доводя объем гексаном до 3,0 мл.
Хроматографическая система I (см. Хроматография <621>) - Газовый хроматограф оснащен детектором захвата электронов и капиллярной колонкой из кварцевого стекла размером 0,53 мм × 30 м, связанной со слоем фазы G1 толщиной 1,5 мкм, и защитной колонкой из кварцевого стекла без покрытия размером 0,53 мм × 6 м, соединенной с инжекторной системой модифицированного насадочного типа. Температуру колонки поддерживают на уровне 200°С. [примечание-Первоначальную температуру колонки можно отрегулировать так, чтобы время удерживания п,п¢-ДДТ и этиона составляло около 3,1 и 2,56 соответственно по отношению к хлорпирифосу.] В качестве газа-носителя используется гелий. Скорость потока около 25 мл в минуту регулируют так, чтобы время удерживания хлорпирифоса составляло около 4 минут. Скорость потока подпиточного газа азота составляет около 40 минут.
Хроматографическая система II - Газовый хроматограф оснащен пламенно-фотометрическим детектором и капиллярной колонкой из кварцевого стекла размером 0,53 - мм × 30 - м, связанной со слоем фазы G3 толщиной 1,0 - мкм, и защитной колонкой из кварцевого стекла без покрытия размером 0,53 - мм × 6 - м, соединенной с модифицированной инжекторной системой насадочного типа колонки. Температуру колонки поддерживают на уровне 200°С. [примечание - Начальную температуру колонки можно отрегулировать так, чтобы время удерживания этиона составляло около 3,36 по сравнению со временем удерживания хлорпирифоса.] Гелий используется в качестве газа-носителя со скоростью потока около 25 мл в минуту, отрегулированной так, чтобы время удерживания хлорпирифоса составляло около 4 минут. Скорость потока подпиточного газа азота составляет около 40 мл в минуту. [примечание-Определите чувствительность детектора для хроматографических систем I и II: выберите затухание электрометра так, чтобы введение 1,5 нг хлорпирифоса вызывало 50%-ное полное-шкалическое отклонение на самописце или принтере-плоттере. Если эти условия детектора выходят за пределы линейного диапазона детектора, настройте его на линейный диапазон и запишите количество в нг хлорпирифоса, вызывающего 50%-ное отклонение полной шкалы при этих условиях.]
Процедура-[примечание-Процедуру, описанную ниже, следует соблюдать для хроматографических систем I и II. ] Вводят отдельно равные объемы (около 5 мкл) соответствующего сложного стандартного препарата и тестируемого препарата в газовый хроматограф, записывают хроматограммы и измеряют площади всех пиков, наблюдаемых на хроматограммах. Сравните площади пиков любого из остатков пестицида на хроматограмме испытуемого препарата, полученного из каждой хроматографической системы, с площадями пиков, которые соответствуют временам удерживания на хроматограмме соответствующего сложного стандартного препарата, полученного из каждой из соответствующих хроматографических систем. Рассчитайте количество, в ppm, отдельного указанного остатка, обнаруженного в отобранной пробе, по формуле:
30(С/Вт)(РУ/РС)
где rU и rS — площади пиков остатка, обнаруженного в тест-препарате и стандартном препарате; соответственно; С – концентрация эталонного пестицида в стандартном препарате, мг/л; W - масса взятого ланолина, г: обнаружено не более 10 м.д. любого отдельного указанного остатка, а сумма всех обнаруженных указанных остатков составляет не более 40 м.д.
Петролатум - Нагрейте около 3 г точно отвешенного на паровой бане при частом помешивании до тех пор, пока потеря массы не станет меньше содержания воды. 40 мл обезвоженного спирта кипятят с 500 мг полученного таким образом сухого ланолина: раствор прозрачный или не более чем опалесцирующий.