Паклитаксел
C47H51NO14 853,91
Бензолпропановая кислота, -(бензоиламино)--гидрокси-, 6,12b-бис(ацетилокси)-12-(бензоилокси)-2a,3,4,4a,5,6,9,10,11,12,12a,12b-додекагидро-4,11-d игидрокси-4а,8,13,13-тетраметил-5-оксо-7,11-метано-1H-циклодека[3,4]бенз[1,2-b]оксет-9-ил сложный эфир, [2aR-[2a,4,4a,6,9(R*,S*),11,12,12a,12b]]-.
(2aR,4S,4aS,6R,9S,11S,12S,12aR,12bS)-1,2a,3,4,4a,6,9,10,11,12,12a,12b-Додекагидро-4,6,9,11,1 2,12b-гексагидрокси-4a,8,13,13-тетраметил-7,11-метано-5H-циклодека[3,4]-бенз[1,2-b]оксет-5-он 6,12b-диацетат, 12-бензоат, 9-эфир с (2R,3S)-N-бензоил-3-фенилизосерином [33069-62-4].
Паклитаксел содержит не менее 97,0 процентов и не более 102,0 процентов C47H51NO14 в пересчете на безводную основу, не содержащую растворителей.
[Внимание! Паклитаксел цитотоксичен. Следует проявлять особую осторожность, чтобы не вдыхать частицы паклитаксела и не подвергать его воздействию на кожу.]
Упаковка и хранение-Храните в плотных, лёгких-устойчивых контейнерах и храните при контролируемой комнатной температуре.
Маркировка - На маркировке указан тип процесса, использованного для производства материала, и тест на родственные соединения, которому соответствует материал.
Справочные стандарты USP<11>-
USP Эндотоксин RS
USP Паклитаксел RS Нажмите, чтобы просмотреть структуру
USP соединение A RS, родственное паклитакселу
Цефаломаннин.
USP соединение B, родственное паклитакселу RS
10-Деацетил-7-Эпипаклитаксел.
Смесь примесей паклитаксела USP RS
Смесь паклитаксела и следующих родственных соединений: аналога пропила, цефаломаннина, аналога втор-бутила, аналога н-бутила, аналога бензила, баккатина VI, аналога пентила и 7 - эпипаклитаксела.
Идентификация-
A: Инфракрасное поглощение<197K>.
B: Время удерживания основного пика на хроматограмме препарата для анализа соответствует времени удерживания на хроматограмме стандартного препарата, полученного в ходе анализа.
Удельное вращение 781S: от 49,0 до 55,0 при 20, в расчете на безводную основу, не содержащую растворителей.
Тестовый раствор: 10 мг на мл в метаноле.
Подсчет микробов<61>и Тесты на определенные микроорганизмы<62>-Общее количество аэробных микробов не превышает 100 КОЕ на г. Соответствует требованиям тестов на отсутствие Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, видов Salmonella и Escherichia coli.
Бактериальные эндотоксины 85-Содержит не более 0,4 эндотоксиновой единицы USP на мг паклитаксела.
Вода, Метод Ic<921>: не более 4,0%.
Остаток при прокаливании<281>: не более 0,2%.
Тяжелые металлы, Метод II<231>: 0,002%.
Родственные соединения-
тест 1 (для материала, помеченного как выделенный из природных источников) - Если материал соответствует этому тесту, на маркировке указывается, что он соответствует тесту 1 на родственные соединения USP.
Разбавитель-Приготовьте, как указано в анализе.
Раствор А - Приготовьте отфильтрованный и дегазированный ацетонитрил.
Решение B-Приготовьте фильтрованную и дегазированную воду.
Подвижная фаза - Используйте различные смеси растворов A и B, как указано для хроматографической системы. При необходимости внесите изменения (см. «Пригодность системы», раздел «Хроматография 621»).
Решение для пригодности системы - Растворите точно взвешенные количества соединения A RS, родственного паклитакселу согласно Фармакопее США, и соединения B RS, родственного паклитакселу согласно Фармакопее США, в метаноле, чтобы получить раствор с известными концентрациями около 10 мкг каждого из них на мл. Перенесите 5,0 мл этого раствора в мерную колбу вместимостью 50 мл, разбавьте разбавителем до необходимого объема и перемешайте.
Стандартный раствор - Растворите с помощью ультразвука точно взвешенное количество паклитаксела RS согласно Фармакопее США в разбавителе и разбавьте количественно, а при необходимости поэтапно, разбавителем, чтобы получить раствор с известной концентрацией около 5 мкг на мл.
Тестовый раствор-Используйте препарат для анализа.
Хроматографическая система (см. Хроматография<621>)-Жидкостный хроматограф оснащен детектором 227-нм и колонкой размером 4,6-мм × 25-см, содержащей насадку L43 5-мкм. Скорость потока составляет около 2,6 мл в минуту. Температуру колонки поддерживают на уровне 30°С. Хроматограф программируют следующим образом.
Время (минуты) Раствор А (%) Раствор Б (%) Элюирование
0–35 35 65 изократический
35–60 35®80 65®20 линейный градиент
60–70 80®35 20®65 линейный градиент
70–80 35 65 изократическая хроматография Раствор, пригодный для использования в системе, и запишите ответы пиков, как указано в процедуре: относительное время удерживания составляет около 0,78 для родственного паклитакселу соединения A и 0,86 для родственного паклитакселу соединения B (относительно времени удерживания паклитаксела, полученного из тестируемого раствора); и разрешение R между родственным соединением паклитаксела А и родственным соединением паклитаксела В составляет не менее 1,0. Хроматографируйте стандартный раствор и записывайте пиковые ответы, как указано в процедуре: относительное стандартное отклонение для повторных инъекций не превышает 2,0%.
Процедура-Введите объем (около 15 мкл) тестируемого раствора в хроматограф, запишите хроматограмму и измерьте площади основных пиков. Рассчитайте процентное содержание каждой примеси в взятой порции паклитаксела по формуле:
100(Пт/Вс)
где F — относительный коэффициент отклика для каждого пика примеси (значения см. в таблице 1); ri – площадь пика для каждой отдельной примеси; и rU представляет собой площадь пика паклитаксела.
Таблица 1
Относительное время удерживания Относительный коэффициент отклика (F) Предел названия (%)
0,24 1,29 Баккатин III 0,2
0,53 1,00 10-Деацетилпаклитаксел 0,5
0,57 1,00 7-Ксилозилпаклитаксел 0,2
0,78 1,26 Цефаломаннин (родственное соединение А паклитаксела) a11
0,78 1,26 2'',3''-Дигидроцефаломаннин а21
0,86 1,00 10-Деацетил-7-эпипаклитаксел (родственное соединение B паклитаксела) 0,5
1,10 1,00 Бензиловый аналог3 b12
1,10 1,00 3'',4''-Дегидропаклитаксел C b22
1,40 1,00 7-Эпицефаломаннин 0,3
1,85 1,00 7-Эпипаклитаксел 0,5
1 Разрешение для этих пиков может быть неполным, в зависимости от присутствующих относительных количеств; сумма а1 и а2 не более 0,5%.
2 Разрешение этих пиков может быть неполным, в зависимости от присутствующих относительных количеств; сумма b1 и b2 не более 0,5%.
3 Родственному соединению, бензильному аналогу присвоено следующее химическое название: 13-эфир баккатина III с (2R,3S)-2-гидрокси-3-фенил-3-(2-фенилацетиламино)пропановой кислотой.
Помимо отсутствия превышения пределов содержания примесей, связанных с паклитакселом, указанных в Таблице 1, обнаружено не более 0,1% любой другой отдельной примеси; и обнаружено не более 2,0% от суммы примесей.
Испытание 2 (для материала, на маркировке которого указано, что оно произведено полусинтетическим способом). Если материал соответствует этому испытанию, на маркировке указывается, что он соответствует Испытанию 2 по родственным соединениям Фармакопеи США.
Разбавитель-Используйте ацетонитрил.
Решение А - Используйте отфильтрованную и дегазированную смесь воды и ацетонитрила (3:2).
Решение B-Используйте фильтрованный и дегазированный ацетонитрил.
Подвижная фаза - Используйте различные смеси растворов A и B, как указано для хроматографической системы. При необходимости внесите изменения (см. «Пригодность системы», раздел «Хроматография 621»).
Раствор для пригодности системы - Растворите точно взвешенные количества паклитаксела RS USP и соединения B RS, родственного паклитакселу USP, в разбавителе, при необходимости встряхивая и обрабатывая ультразвуком, чтобы получить раствор с известными концентрациями примерно 0,96 мг и 0,008 мг на мл соответственно.
Тестовый раствор - Перенесите около 10 мг паклитаксела, точно взвешенного, в мерную колбу емкостью 10 мл, растворите и разбавьте разбавителем до объема, встряхивая и обрабатывая ультразвуком, если необходимо, и перемешайте.
Хроматографическая система (см. Хроматография 621). Жидкостный хроматограф оснащен детектором 227 нм и колонкой размером 4,6 мм × 15 см, содержащей насадку L1 3 мкм. Скорость потока составляет около 1,2 мл в минуту. Температуру колонки поддерживают на уровне 35°С. Хроматограф программируют следующим образом.
Время (минуты) Раствор А (%) Раствор Б (%) Элюирование
0-20 100 0 изократический
20-60 100®10 0®90 линейный градиент
60-62 10®100 90®0 линейный градиент
62-70 100 0 изократическая хроматография раствора для проверки пригодности системы и запись пиковых ответов, как указано в процедуре: относительное время удерживания составляет около 0,94 для родственного паклитакселу соединения B и 1,0 для паклитаксела; разрешение R между родственным соединением паклитаксела B и паклитакселом составляет не менее 1,2; а относительное стандартное отклонение для повторных инъекций составляет не более 2,0%.
Процедура - Отдельно введите в хроматограф равные объемы (около 15 мкл) разбавителя и тестируемого раствора, запишите хроматограммы и измерьте площади всех пиков. Не обращайте внимания на любые пики, вызванные разбавителем. Рассчитайте процентное содержание каждой примеси в взятой порции паклитаксела по формуле:
100(Пт/Пс)
где F — относительный коэффициент чувствительности для каждой примеси (значения см. в таблице 2); ri — площадь пика для каждой примеси, полученная из испытуемого раствора; и rs представляет собой сумму площадей всех пиков, полученных из тестируемого раствора.
Таблица 2
Относительное время удерживания Относительный коэффициент отклика (F) Предел названия (%)
0,11 1,24 10-Деацетилбаккатин III 0,1
0,20 1,29 Баккатин III 0,2
0,42 1,39 Фотодеградант2 0,1
0,47 1,00 10-Деацетилпаклитаксел 0,5
0,80 1,00 2-Дебензоилпаклитаксел-2-пентеноат 0,7
0,921 1,00 Оксетановое кольцо раскрыто, ацетил и бензоил мигрировали2 x1
0,921 1,00 10-Ацетоацетилпаклитаксел x2
0,941 1,00 10-Деацетил-7-эпипаклитаксел (родственное соединение B паклитаксела) x3
1,37 1,00 7-Эпипаклитаксел 0,4
1,45 1,00 10,13-Биссайдцепочепалитаксел2 0,5
1,54 1,00 7-Ацетилпаклитаксел 0,6
1,80 1,75 13-Тес-баккатин III 0,1
2,14 1,00 7-Тес-паклитаксел 0,3
1 Разрешение для этих пиков может быть неполным, в зависимости от присутствующих относительных количеств; сумма х1, х2 и х3 составляет не более 0,4%.
2 Родственным соединениям присвоены следующие химические названия: Фотодеградант; Оксетановое кольцо открылось, ацетил и бензоил мигрировали; и 10,13-Биссайдцепепклитаксел:
Фотодеградант
(1R,2R,4S,5S,7R,10S,11R,12S,13S,15S,16S)-2,10-диацетилокси-5,13-дигидрокси-4,16,17,17-тетра метил-8-окса-3-оксо-12-фенилкарбонилоксипентацикло[11.3.1.01,11.04,11.07,10]гептадек-15-ил
(2R,3S)-2-гидрокси-3-фенил-3-(фенилкарбониламино)пропаноат
Оксетановое кольцо открылось, ацетил и бензоил мигрировали.
(1S,2S,3R,4S,5S,7S,8S,10R,13S)-5,10-диацетилокси-1,2,4,7-тетрагидрокси-8,12,15,15-тетраметил-9-оксо-4-(фенилкарбонилоксиметил)трицикло[9.3.1.03,8]пентадек-11-ен-13-ил
(2R,3S)-2-гидрокси-3-фенил-3-(фенилкарбониламино)пропаноат
10,13-Биссидцепочепалитаксел
Баккатин III 13-эфир с (2R,3S)-2-гидрокси-3-фенил-3-(фенилкарбониламино)пропановой кислотой, 10-эфир с (2S,3S)-2-гидрокси-3-фенил-3-(фенилкарбониламино)пропановой кислотой
Помимо отсутствия превышения пределов содержания примесей, связанных с паклитакселом, указанных в Таблице 2, обнаружено не более 0,1% любых других отдельных примесей; и обнаружено не более 2,0% от суммы примесей.
тест 3 (для материала, на маркировке которого указано, что он получен в результате процесса ферментации растительных клеток). Если материал соответствует этому тесту, маркировка указывает, что он соответствует тесту 3 на родственные соединения USP.
Раствор А - Приготовьте отфильтрованную и дегазированную смесь воды и ацетонитрила (3:2).
Раствор B-Приготовьте отфильтрованный и дегазированный ацетонитрил.
Подвижная фаза - Используйте различные смеси растворов A и B, как указано для хроматографической системы. При необходимости внесите изменения (см. «Пригодность системы», раздел «Хроматография 621»).
Раствор для пригодности системы - Растворите смесь примесей паклитаксела USP USP в ацетонитриле, при необходимости обработайте ультразвуком, чтобы получить раствор с известной концентрацией около 1 мг на мл.
Стандартный раствор - Растворите точно взвешенное количество паклитаксела RS USP в ацетонитриле, при необходимости обработав ультразвуком, чтобы получить раствор с известной концентрацией около 1 мг на мл.
Тестовый раствор - Перенесите примерно 10 мг паклитаксела (точно взвешенного) в мерную колбу емкостью 10 мл. Растворите и разбавьте ацетонитрилом до объема, при необходимости обработав ультразвуком, и перемешайте.
Хроматографическая система (см. Хроматография 621). Жидкостный хроматограф оснащен детектором 227 нм и колонкой размером 4,6 мм × 15 см, содержащей насадку L1 3 мкм. Скорость потока составляет около 1,2 мл в минуту. Хроматограф программируют следующим образом.
Время (минуты) Раствор А (%) Раствор Б (%) Элюирование
0-28 100 0 изократический
28-33 100®98 0®2 линейный градиент
33–58 98®10 2®90 линейный градиент
58-60 10 90 изократический
60-63 10®100 90®0 линейный градиент
63-70 100 0 изократический хроматографируйте раствор, пригодный для использования в системе, и записывайте пиковые ответы, как указано в процедуре: разрешение R между паклитакселом и бензильным аналогом составляет не менее 1,8. Хроматографируйте стандартный раствор и записывайте пиковые ответы, как указано в процедуре: относительное стандартное отклонение для повторных инъекций не превышает 2,0%. [примечание – для целей идентификации пиков приблизительное относительное время удерживания приведено в Таблице 3. Относительное время удерживания измеряется в сравнении с паклитакселом. ]
Таблица 3
Имя Относительный срок хранения (%)
Пропиловый аналог1 0,54 0,2
Цефаломаннин (родственное соединение А паклитаксела) 0,76 0,5
втор-Бутиловый аналог2 0,81 0,2
н-Бутиловый аналог3 0,89 0,1
Бензиловый аналог 1,10 0,4
Баккатин VI 1,23 0,2
Пентиловый аналог4 1,31 0,2
7-Эпипаклитаксел 1,51 0,4
1 Родственному соединению-аналогу пропила присвоено следующее химическое название: 13-эфир баккатина III с (2R,3S)-3-бутаноиламино-2-гидрокси-3-фенилпропановой кислотой.
2 Родственному соединению втор-бутильный аналог присвоено следующее химическое название: 13-эфир баккатина III с (2R,3S)-2-гидрокси-3-(2-метилбутаноиламино)-3-фенилпропановой кислотой.
3 Родственному соединению н-бутильный аналог присвоено следующее химическое название: 13-эфир баккатина III с (2S,3S)-2-гидрокси-3-(пентаноиламино)-3-фенилпропановой кислотой.
4 Родственному соединению аналогу пентила присвоено следующее химическое название: 13-эфир баккатина III с (2R,3S)-3-(гексаноиламино)-2-гидрокси-3-фенилпропановой кислотой.
Процедура-Введите объем (около 12 мкл) тестируемого раствора в хроматограф, запишите хроматограмму и измерьте площади всех пиков. Рассчитайте процентное содержание каждой примеси в взятой порции паклитаксела по формуле:
100(ри / ру)
где ri — отклик каждой отдельной примеси; и rU представляет собой сумму площадей всех пиков, полученных из тестируемого раствора. Помимо отсутствия превышения пределов содержания примесей, связанных с паклитакселом, указанных в Таблице 3, обнаружено не более 0,1% любой другой отдельной примеси; и обнаружено не более 2,0% от суммы примесей.
анализ-
Разбавитель - Приготовьте смесь метанола и уксусной кислоты (200:1).
Подвижная фаза - Приготовьте отфильтрованную и дегазированную смесь воды и ацетонитрила (11:9). При необходимости внесите изменения (см. «Пригодность системы», раздел «Хроматография 621»).
Стандартное приготовление - Растворите, при необходимости, используя ультразвук, точно взвешенное количество паклитаксела RS согласно Фармакопее США в разбавителе и разбавьте количественно, а при необходимости поэтапно, разбавителем, чтобы получить раствор с известной концентрацией около 1 мг на мл.
Подготовка к анализу - Перенесите примерно 10 мг паклитаксела (точно взвешенного) в мерную колбу емкостью 10 мл. Растворите в разбавителе, при необходимости используя ультразвук, разбавьте разбавителем до объема и перемешайте.
Хроматографическая система (см. Хроматография<621>)-Жидкостный хроматограф оснащен детектором 227-нм и колонкой размером 4,6-мм × 25-см, содержащей насадку L43 5-мкм. Скорость потока составляет около 1,5 мл в минуту. Хроматографируйте стандартный препарат и записывайте пиковые ответы, как указано в процедуре: фактор хвоста находится в пределах от 0,7 до 1,3; а относительное стандартное отклонение для повторных инъекций составляет не более 1,5%.
Процедура - Отдельно введите в хроматограф равные объемы (около 10 мкл) стандартного препарата и препарата для анализа, запишите хроматограммы и измерьте площади основных пиков. Рассчитайте количество, в мг, C47H51NO14 в взятой порции паклитаксела по формуле:
10С(ру/РС)
где C — концентрация паклитаксела RS согласно Фармакопее США в мг на мл в стандартном препарате; и rU и rS представляют собой пиковые ответы на паклитаксел, полученные для препарата для анализа и стандартного препарата, соответственно.